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    十招致敵!不再煩惱移液污染

    2021-01-28 15:50:21  來源:賽多利斯

    Overview
    在移液操作中,要獲得可靠的結果,防止污染至關重要。需要辨識出潛在的污染機制,以便制定針對性的解決方案。

     氣溶膠,是指懸浮在氣體中的固體或液體顆粒,通常產生于許多實驗室活動中,例如使用空氣正壓式原理的移液器進行移液時,而氣溶膠是移液操作中的重要污染來源。在使用非過濾式的移液器吸頭時,氣溶膠可能轉移至移液器內部,繼而導致后續的樣本受到污染。輕緩小心的移液操作有助于減少氣溶膠的形成。

     

    本文將討論產生于移液操作的三種污染類型:
    - 移液器對樣本的污染
    - 樣本對移液器的污染
    - 樣本對樣本的污染

     

    文末,還有10個避免移液污染的小貼士,為你的移液工作排除憂患。

     

     

    1. 移液器對樣本的污染

    當受污染的移液器或移液器吸頭污染樣本時,就會造成這種類型的污染。

    大多數制造商生產的移液器吸頭有多種純度級別。純度可分為三個級別:

    - 無純度證明
    - 有證明不含 DNA 酶、RNA 酶和內毒素等污染物
    - 經過滅菌,不含微生物


    DNA酶、RNA酶和內毒素等污染物難以通過任何滅菌法去除,因此,在制造期間防止污染非常重要。需要單獨檢測是否含有這些污染物,通常由第三方實驗室進行。制造后滅菌可確保吸頭在交付給客戶時不含任何微生物(細菌、virus等)。

    移液器吸頭還可以是浸出物(源自材料或工藝設備,會污染樣本的痕量化學品)的潛在來源。潛在浸出物包括重金屬、紫外穩定劑、抗氧劑、色素、脫模劑、生物殺菌劑和表面活性劑等。高品質的吸頭是由100%純聚丙烯,在高質量的生產設備中制造而成,且不含浸出物。建議您與吸頭制造商確認這一點。

    在日常的實驗室工作中,通過以下這些簡單的準則可避免移液器至樣本的污染:

    - 針對應用選擇相關純度級別的吸頭。
    - 使用(預滅菌的)濾芯吸頭或正壓置換式吸頭。
    - 對于某些制造商生產的移液器,可使用安全圓錐過濾器。過濾器可防止氣溶膠進入移液器內部并污染后續的樣本。
    - 在每個樣本操作后,務必更換移液器吸頭。
    - 定期對可能接觸樣本的移液器或組件進行高壓滅菌或消毒。
     

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    2. 樣本對移液器的污染
    當被轉移的液體或來自被轉移液體的氣溶膠顆粒進入移液器內部時,即發生這種類型的污染。為將樣本對移液器的污染風險降低,建議采取以下預防措施:


    - 松開移液器按鈕時務必要緩慢,以防止移液器吸頭內有氣溶膠形成和不受控的液體飛濺。
    - 在移液期間保持移液器垂直,并將移液器垂直存放。這能防止液體流進移液器內部。
     - 使用濾芯吸頭或正壓置換式吸頭,以防止氣溶膠從樣本進入移液器內部。或者,可以在移液器吸頭上使用安全圓錐過濾器。

     

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    3. 樣本對樣本的污染
    當來自某個樣本的氣溶膠或液體殘留被帶到下一樣本時,即發生樣本對樣本的污染(也叫殘留污染)。例如,當同一移液器吸頭被多次使用時,即發生這種污染。為避免殘留污染:

     

    - 使用濾芯吸頭或正壓置換式吸頭,以防止氣溶膠從樣本進入移液器內部,再進入下一樣本。或者,可以移液器洗頭上使用安全圓錐過濾器。
    - 在每個樣本操作后,務必更換移液器吸頭。
    - 如果懷疑移液器受到污染,請按制造商的說明對移液器進行高壓滅菌或消毒。

     

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    定義
     

    去污
    任何通過降低微生物負荷以防止污染的活動。包括各種滅菌、消毒和殺菌方法。

     

    滅菌
    滅活所有微生物,包括細菌內生孢子。可通過使用蒸汽、加熱、化學品或輻射來實現。
     

    高壓滅菌
    對實驗室來說,高壓滅菌(濕熱)是一種有效的滅菌法。例如:使用高溫高壓的飽和蒸汽來滅活微生物,以及對實驗室塑料和玻璃器皿等的去污處理。曝露時間和溫度至關重要。此外,蒸汽需要穿透整個微生物負荷方可有效地凈化。
     

    消毒
    清除幾乎所有病原性微生物(不包括細菌內生孢子)并將微生物污染降低至可接受的水平。這是一種用于表面凈化的實用方法。應根據設想的污染類型選擇消毒劑(如:醇類、酚類化合物、鹵素)、濃度和曝露時間。
     

    殺菌
    對活組織應用抗微生物化學品以消除微生物。

     

    DNA酶
     一類強大的酶(核酸酶),可通過將 DNA 水解成短片段來降解它。在 DNA 純化期間,即使是痕量的 DNA 酶,也可導致 PCR 等DNA技術產物產率低、無產物或產物降解。污染源:與人接觸、唾液、細菌。

     

    RNA酶
     一類強大的酶(核酸酶),可催化 RNA 降 解成短的片段。這類酶非常穩定,難以去除。污染源:皮膚油脂、毛發、眼淚、細菌。

     

    內毒素
     脂多糖(一種大分子)是大腸桿菌、沙門氏菌、志賀氏桿菌、假單胞菌和嗜血桿菌等革蘭氏陰性菌外膜的組成部分。可造成人發燒并損害細胞培養物的生長。當細菌死亡和細胞壁被破壞時,它會被釋放到環境中。污染源:內毒素存在于細菌能生長的任何地方,如:空氣,水,土壤,皮膚,原材料,任何非無菌環境等。

     


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    《避免移液污染的10大注意事項》
     

     


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